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細胞名稱:小鼠小腸上皮細胞MODE-K
產(chǎn)品規(guī)格:T25培養(yǎng)瓶x1;1.5ml凍存管x2
細胞數(shù)量:1x10^6;1x10^6
保存溫度:37℃;-198℃
運輸方式:常溫保溫運輸;干冰運輸
安全等級:1
用途限制:僅供科研2類
培養(yǎng)體系:DMEM高糖培養(yǎng)基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone)
培養(yǎng)溫度:37℃
二氧化碳濃度:5%
簡介:小鼠小腸上皮細胞MODE-K取自ICR小鼠小腸組織,貼壁培養(yǎng),上皮樣。
注釋:倍增時間54h
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參考文獻
厄洛替尼對大鼠小腸上皮細胞跨膜轉(zhuǎn)運的影響劉治芳;朱艷妮生物化工
原花青素對玉米赤霉烯酮致MODE-K細胞氧化損傷及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡保護作用研究陳新亮沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
驗收細胞注意事項
1、收到小鼠小腸上皮細胞MODE-K,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系。
2、收到小鼠小腸上皮細胞MODE-K細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到小鼠小腸上皮細胞MODE-K細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右,血清濃度還是在10%。
4、收到小鼠小腸上皮細胞MODE-K細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
6、24小時后,小鼠小腸上皮細胞MODE-K細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之完全脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
特別提醒:原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
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