DT40雞淋巴瘤細胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細胞株經鳥類白血病病毒誘導建株的細胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到，法氏囊中生成的腫瘤制成細胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經過一次體內移植后，建立了DT40細胞。DT40細胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表達的c-myc RNA水平較高。DT40細胞缺少一個正常c-myc基因，但含有兩個拷貝ALV去調控的myc基因。DT40細胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在IgL位點，DT40包含一個重排和一個胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細胞中都能誘導組織相容性(MHC)Ⅱ類抗原表達。v-rel誘導的MHCⅡ表達比c-rel誘導快，且其有效性在數周后達到c-rel的50倍。DT40細胞呈淋巴母細胞表型;傳染性檢測表明，DT40細胞釋放低水平的傳染性RAV-1.DT40細胞株可以用于穩轉研究。

　　種屬：雞

　　年齡(性別)1日齡

　　組織來源：法氏囊，淋巴瘤

　　生長特性：懸浮

　　細胞形態：淋巴母細胞樣

　　生長培養基DMEM高糖+0.05mM β-mercaptoethanol+10% Tryptose Phosphate Broth+5% Chicken Serum+10% FBS+1% P/S

　　培養條件氣相：空氣，95%;CO2.5%溫度：37℃

　　細胞處理：

　　1)凍存細胞的復蘇：

　　將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

　　2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

　　1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL)，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間)，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

　　3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

　　3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

　　下面T25瓶為例;

　　1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

　　2.1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

　　3.將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。